前導(dǎo)肽介導(dǎo)的SprD蛋白體外折疊研究

摘要： 為提高以前體形式合成的蛋白質(zhì)折疊與成熟效率，以枯草桿菌蛋白酶SprD為研究對象，通過蛋白重組表達(dá)、氨基酸定點(diǎn)突變、包涵體純化結(jié)合體外復(fù)性、酶催化性能測定等方法比較各前體蛋白折疊成熟情況。結(jié)果表明，野生型前導(dǎo)肽介導(dǎo)的SprD前體蛋白可以在230 min內(nèi)完成成熟，時(shí)間較長；成熟肽序列中E112A、S221A及S221C等突變導(dǎo)致相應(yīng)前體蛋白成熟時(shí)間延長或成熟失??；而前導(dǎo)肽串聯(lián)表達(dá)...