應用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)敲除小窩蛋白1基因的神經細胞構建與功能鑒定

摘要： 目的利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)建立小窩蛋白1(CAV-1)基因敲除的神經母細胞瘤細胞株(SH-SY5Y),并驗證其對流行性乙型腦炎病毒(JEV)的易感性。方法根據(jù)CRISPR/Cas9靶點設計原則,基于人源CAV-1基因的外顯子區(qū)(EXON)序列設計小向導RNA(sgRNA),將sgRNA連接到載體PX459質粒上。將重組質粒轉染至SHSY5Y細胞中,使用嘌呤霉素篩...