按照程序完成開機、校準和啟動CellQuest軟件后,即可進行樣品檢測。(一)連接流式細胞儀并調出儀器參數(shù)窗口1.從“Acquire”菜單中選擇“ConnecttoCytometer”連接儀器,并調出“Counter”窗口。從“Cytometer”菜單中選擇“Compensation”“Detec...[繼續(xù)閱讀]

    每天實驗完畢,應在關閉儀器之前進行清洗,正確的清洗維護可以保證儀器正常工作。每天實驗結束后,為了防止管路堵塞或殘留有熒光染料,造成交叉污染,應先換上蒸餾水,按“Prime”,將進樣針內的細胞盡量沖出,然后換上1:5的次氯酸鈉...[繼續(xù)閱讀]

    (一)流式細胞儀的每月維護要求每個月進行一次系統(tǒng)管路維護,如果儀器處理樣本量很大,或經(jīng)常使用附著性染料(如PI、AO、TO等),則需要增加管路清洗頻率。1.打開FACScalibur流式細胞儀。2.取出鞘液筒。3.斷開鞘液過濾器鞘液過濾器上端...[繼續(xù)閱讀]

    FCSlistmode數(shù)據(jù)文件是流式細胞儀的標準格式檔案。該文件含有從流式細胞儀收取細胞資料,含有4～6個參數(shù)。一般軟件無法打開listmode數(shù)據(jù)文件(圖3-8),需借助如CellQuest、Winlist、WinMDI等分析軟件,才可開啟、繪圖并進行分析統(tǒng)計。圖3-8l...[繼續(xù)閱讀]

    (一)開啟設備1.打開穩(wěn)壓器電源,打開位于儀器左側的總電源,將同時開啟儀器、液流車以及激光電源。2.啟動計算機,在出現(xiàn)的登錄對話框中,輸入用戶名和密碼,點擊“OK”。觀察桌面右下角系統(tǒng)時間旁的網(wǎng)絡圖標中有一個顯示儀器與電...[繼續(xù)閱讀]

    (一)BDFACSCanto臨床軟件進行儀器日常校準無論在BDFACSCanto臨床軟件還是在BDFACSDiva軟件中運行樣本,都需要使用BDFACSCanto臨床軟件來運行自動化設置和質量控制(QC)。利用BDFACS七色設置微球,對檢測器電壓進行調節(jié),把設置微球調整在預定的...[繼續(xù)閱讀]

    (一)FACSCantoClinical六色免洗淋巴細胞亞群檢測1.主要試劑(1)抗體:CD3/CD8/CD45/CD4/CD16+56/CD19。(2)FACSLysingSolution(溶血素)(10×,使用前用蒸餾水稀釋成1×)。2.實驗步驟(1)在流式管中加入50μL充分混勻的抗凝全血。注意:樣本使用EDTA抗凝全血,室溫...[繼續(xù)閱讀]

    (一)CaliBRITE四色小球模擬細胞演示四色實驗樣本獲取和分析1.主要試劑BDCaliBRITE3beads、BDCaliBRITEAPCbeads。2.樣本制備(1)取5支流式進樣管,分別標記為unlable、FITC、PE、PerCP、APC。(2)5支管中分別加入1滴混勻的unlable小球,除unlable管外,另外4支...[繼續(xù)閱讀]

    (一)清洗1.在Browser中指定任意一管Tube,樣本管中盛有0.5%～1%次氯酸鈉,高速運行樣品5min。2.換DI水,高速運行樣品至少5min,然后取下樣本管。(二)關閉液流選擇Cytometer>FluidicsShutdown運行關閉液路程序,將所有管路中的鞘液排出,并用清洗液...[繼續(xù)閱讀]

    (一)清洗用于排除液路系統(tǒng)氣泡。無論何時,更換容器時或做其他保養(yǎng)時液體管道都要先與液流車斷開,再執(zhí)行該保養(yǎng)程序。1.選擇Cytometer>CleaningModes>PrimeafterTankRefil。2.在“檢查框”中選中被操作的方形容器,點擊“OK”(圖3-18)。圖...[繼續(xù)閱讀]